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Aller plus loin
Escherichia coli : au cœur de la matriX !
Cette méthodologie autorise l’édition de génome ou l’édition de base (modification ciblée d’une portion d’ADN génomique ou d’une seule base) et le CRISPR interference ou CRISPRi (répression ciblée de l’expression d’un gène)
(i) Edition de génome : coupure double brin de l’ADN chromosomique par le complexe gRNA-Cas sauvage puis recombinaison avec une molécule portant l’allèle d’intérêt. (ii) Edition de base : coupure simple brin de l’ADN chromosomique par le complexe gRNA-Cas nickase puis positionnement de l’éditeur de base fusionné à nCas. (iii) CRISPRi : ciblage d’une séquence de lecture ouverte par le complexe gRNA-deadCas (catalytiquement inactive) puis éjection de l’ARN polymérase en cours de transcription.
Ces méthodologies peuvent être utilisées seules ou en combinaison l’une avec l’autre au sein d’une même cellule, étendant à l’infini les possibilités d’ingénierie du génome.
Références bibliographiques :
